应用蛋白质L检测和纯化培养上清液中的单链抗体
李民友1
虞东方2
张海涛1
冯哲玲1
李秀英1
刘祖国2
朱振宇1
1.中山大学中山医学院生物化学教研室,广东,广州,5100892.中山大学中山眼科中心,广东,广州510089
摘要：目的探索一种检测和纯化单链抗体的新方法.方法使用不同的酶标记物,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度.含单链抗体的培养上清液经超滤、 313 g/L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L-琼脂糖亲和层析纯化单链抗体.结果 HRP标记蛋白质L可检测到1∶16孔的阳性结果,而HRP 标记蛋白质A仅检测到1∶2孔的阳性结果.用9E10单抗检测培养上清液中的单链抗体时,除加入未经稀释培养上清液孔略有显色外,其他加入稀释后的培养上清液孔均不显色.蛋白质L亲和层析纯化的单链抗体经SDS-PAGE及ELISA鉴定,所得到的单链抗体纯度高、活性保持良好.结论蛋白质L是一种能灵敏检测和有效纯化单链抗体的结合物,本实验建立的方法是一种有效、简便实用的方法.
关键词：蛋白质L单链抗体培养上清液检测纯化
分类号：R392-33(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30225044)广东省科技攻关计划(2001]227)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 231-233 )
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