人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备
叶菁
陈广生
黄亚渝
宋宏萍
张秀敏
隋延仿
1.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100322.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100323.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100324.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100325.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100326.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的获得MAGE-1蛋白,制备其多克隆抗体.方法采用RT-PCR方法从人肝细胞癌HepG2中克隆MAGE-1基因,构建其原核表达质粒,并进行原核表达与蛋白分离纯化.免疫动物,制备MAGE-1的抗血清.经固化GST蛋白的Sepharose 4B交叉吸收后,采用琼脂双扩实验和ELISA方法检测其效价和特异性.结果所得MAGE-1 cDNA序列与GeneBank中公布的一致.构建了MAGE-1 194-309aa片段的原核表达质粒pGEX-MAGE-1,经诱导及分离纯化,得到一M,约42000的融合蛋白.免疫动物,分离血清,经交叉吸收后,琼脂双扩及ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与MAGE-1蛋白特异性结合.结论本研究成功地获得MAGE-1蛋白,制备的抗MAGE-1多克隆抗体,经交叉吸收后能够特异性地与MAGE-1蛋白结合,为研究MAGE-l在肿瘤诊断和免疫治疗中的应用提供了实验条件.
关键词：黑色素瘤抗原-1克隆原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30271464)军队医药卫生科研项目(01Z084)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 259-262 )
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