SARS-N蛋白真核表达质粒的构建及其免疫原性
王英1
王希良2
曾政3
田光2
赵光宇2
石辛甫2
马丽娟2
1.军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室,北京,100071;第二炮兵总医院呼吸科,北京,1000882.军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室,北京,1000713.西北农林科技大学动物科技学院寄生虫研究室,陕西,杨陵,712100
摘要：目的选取SARS-CoV N蛋白编码基因为研究对象,构建真核表达质粒PVAX1/N,并在体外转染COS-7细胞的基础上免疫Balb/c小鼠,测定血清总IgG水平及诱发的细胞免疫反应.方法用RT-PCR方法从感染SARS病毒的VeroE6细胞中扩增得到约1 269bp的片段,构建重组真核表达质粒PVAX1/N,转染COS-7细胞后,用细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达;免疫Balb/c小鼠后,用ELISA方法测血清总IgG水平,MTS/PES比色法测定脾T淋巴细胞增殖,ELISPOT法测定CD8+T淋巴细胞的活性.结果构建的重组质粒经酶切及测序鉴定,与GenBank中登录的序列完全一致;细胞免疫化学鉴定结果显示:重组质粒可在COS-7细胞中表达有免疫原性的SARS-CoV N蛋白;免疫小鼠血清中检测到较高滴度的抗体;T淋巴细胞增殖及CTL活性均明显优于对照组(P＜0.01).结论成功构建真核表达质粒PVAX1/SARS-CoV N,并能诱导免疫小鼠产生特异性的抗SARS抗体及特异性的细胞免疫反应.
关键词：SARS-CoV真核表达质粒核蛋白
分类号：R78(口腔科学)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 281-284 )
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