抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达
杨洁1
郝晓柯2
孙脊峰1
赵晶3
于翠娟3
许彦鸣3
金明3
王成济3
杨安钢3
1.第四军医大学唐都医院肾脏内科,陕西,西安,7100382.第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心,陕西,西安,7100323.第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的获得鼠抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因并在大肠杆菌中表达.方法从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系E4\B7中提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)克隆Fd段和κ链基因;构建到噬粒pComb3中;并用ELISA、Western blotting和免疫细胞化学分析证明表达的Fab段特异性结合人精浆蛋白.结果从分泌抗人精浆蛋白的鼠单克隆抗体杂交瘤细胞系E4B7中克隆出了重链Fd段和κ链基因,经序列测定表明,Vx属于鼠免疫球蛋白XⅢ家族,VH与鼠免疫球蛋白MUSIGHAEI同源性最高.将该Fd和κ链基因克隆到表达载体pComb3中,在大肠杆菌中获得了表达.结论 ETISA、Western blotting和免疫细胞化学分析表明,表达的Fab段可以特异性的与人精浆蛋白结合.
关键词：人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2]01AA215321)国家自然科学基金(2000-65-66;39925036)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 310-312,316 )
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