结核杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子真核表达质粒的构建及体外表达
刘焰1
刘君炎1
马立新2
居巍1
彭剑虹3
刘汉燕1
1.武汉大学医学院免疫学系,武汉,4300712.湖北大学生命科学院微生物研究室,武汉,4300643.武汉大学中南医院基因诊断中心,武汉,430071
摘要：目的构建结核杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子真核表达质粒.方法采用PCR的方法从结核杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出Ag85B及ESAT-6基因,将其分别定向克隆入真核双表达载体pIRES,构建同时表达两个目的基因的双顺反子重组质粒.进行酶切分析及序列测定后,用脂质体包裹体外转染A549细胞,RT-PCR检测Ag85B及ESAT-6的表达.结果核酸序列测定证实重组质粒构建正确;该重组质粒能在体外表达Ag85B及ESAT-6 mRNA.结论成功构建了结核杆菌Ag85B及ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达,为进一步在整体动物水平的实验研究奠定了基础.
关键词：结核杆菌Ag85BESAT-6双顺反子
分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：湖北省科技攻关计划(2003AA3031304)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 33-36 )
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