小鼠CD4+CD25+T细胞的分离、鉴定和体外功能的检测
周洁
袁劲
周鸿敏
杜敦峰
陈必成
昌盛
陈忠华
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300302.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300303.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300304.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300305.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300306.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,4300307.华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室,武汉,430030
摘要:目的建立CD4+CD25+T细胞的免疫磁性分离(MACS)方法,并检测其体外免疫抑制功能.方法分离C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠脾脏细胞后运用MACS法分离CD4+CD25+T淋巴细胞,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测选出细胞的活性和纯度,用淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能.结果MACS分选法分选出的CD4+CD25+T细胞活性>97%,纯度>95%;此方法获得的CD4+CD25+T细胞在体外不增殖,经丝裂原活化后可以抑制同品系小鼠和异品系小鼠的CD4+CD25-T细胞增殖,这种抑制作用具有剂量依赖性.结论MACS法可简单迅速分选出高纯度无菌CD4+CD25+T细胞,且不影响细胞活力.CD4+CD25+T调节性细胞在体外具有免疫无能和免疫抑制作用;丝裂原活化的该细胞免疫抑制功能具有剂量依赖性,但不具有抗原特异性.
关键词:CD4+CD25+T细胞免疫磁性分离AlamarBlue免疫无能免疫抑制
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2003CB515505)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 92-95,99 )
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