人重组pMAGE-A1/EGFP真核表达质粒的构建与表达
于津浦1
张斌2
任秀宝1
1.天津医科大学附属肿瘤医院,免疫室,天津,3000602.天津医科大学附属肿瘤医院,乳腺科,天津,300060
摘要：目的特异克隆MAGE-A1开放读码框基因,构建以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的包含MAGE-A1的真核表达载体并转染人PBMC来源DC细胞.方法根据MAGE-A1特征序列设计PCR扩增引物,从Mel-526中扩增MAGE-A1基因开放读码框,并克隆至pIRES-EGFP中,构建人重组pMAGE-Al/EGFP真核表达质粒.利用电转染方法将该重组质粒转入人外周血来源DC细胞并检测MAGE-A1和EGFP的表达情况.结果成功构建真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,转染人PBMC来源DC细胞并检测到MAGE-A1和EGFP表达,两者表达率分别为(8.8±0.9)%和(8.47±0.78)%,无统计学差异.结论成功构建人重组真核表达质粒pMAGE-A1/EGFP,为开展MAGE-A1为基础的免疫治疗提供有利的分子生物学工具.
关键词：MAGE-A1基因绿色荧光蛋白基因克隆真核表达质粒
分类号：R730.51(一般性问题)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 107-110 )
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