疏水层析法和凝胶过滤法分离HI47抗CD20 F(ab')2之比较
许元生
熊冬生
肖瑛
范冬梅
王金宏
杨纯正
1.中国医学科学院血液学研究所,天津,3000202.中国医学科学院血液学研究所,天津,3000203.中国医学科学院血液学研究所,天津,3000204.中国医学科学院血液学研究所,天津,3000205.中国医学科学院血液学研究所,天津,3000206.中国医学科学院血液学研究所,天津,300020
摘要：目的比较疏水层析和凝胶过滤两种方法分离纯化HI47抗CD20 F(ab')2的优缺点.方法采用亲和层析柱protein-G对发酵菌体裂解液进行粗纯化,分别采用疏水层析法和凝胶过滤法进行抗CD20 F(ab')2的分离纯化:疏水层析采用梯度洗脱,80%B液洗脱20min,100%B液洗脱30 min;凝胶过滤以50mmol/L PB缓冲液(pH 7.0),0.8 mL/min洗脱4 h.结果粗纯化产物主要含F(ab')2、Fab',含量分别为19.6%、59.7%.采用疏水层析法1 h即可完成分离,F(ab')2回收率为67%,纯度为89.3%;凝胶过滤4 h完成分离,F(ab')2回收率为65%,纯度为90.5%.FACS结果表明,两者结合Raji细胞的阳性率分别为99.93%和99.97%.结论疏水层析分离纯化抗CD20 F(ab')2简单、快速、回收率高、纯度高,适用于大规模的工业化生产.
关键词：疏水层析凝胶过滤F(ab’)2
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家科技攻关项目(2000141、20001AA215341)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 142-144,147 )
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