树突状细胞靶向性DNA疫苗的构建及其在CHO细胞的表达
朱波1
程晓明2
郭波3
吴玉章3
陈正堂1
1.第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心,重庆 4000372.第三军医大学新桥医院全军呼吸研究所,重庆 4000373.第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆 400038
摘要：目的构建含OVA-Fc融合基因的真核表达质粒,证明其能在真核细胞CHO细胞表达.方法通过PCR从OVA-pcDNA3.1质粒中扩增出全长的小鼠OVA cDNA,酶切后克隆到含有小鼠IgG2a Fc cDNA的真核载体pMIgV,然后将OVA-Fc酶切后亚克隆入pcDNA3.1,构建真核表达载体OVA-Fc-pcDNA3.1;脂质体转染法将其导入CHO细胞,流式细胞仪、Western blot、ELISA法检测融合蛋白OVA-Fc的表达.结果酶切鉴定和序列测定证明真核表达载体OVA-Fc-pcDNA3.1构建正确;流式细胞术、Western blot、ELISA法均检测到转染的CHO细胞能表达OVA-Fc融合蛋白.结论 OVA-Fc-pcDNA3.1真核表达质粒构建正确并能在真核细胞中表达,该质粒的成功构建与表达为进一步将其作为DNA疫苗治疗肿瘤、哮喘等疾病奠定了基础.
关键词：树突状细胞卵白蛋白Fc疫苗
分类号：R392.11(医学免疫学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30200120,30300150)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2001CB510001)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 163-165,169 )
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