HSP70基因的克隆与表达
金欢胜1
吴雄飞2
金锡御2
杨青浩3
倪兵4
1.第三军医大学西南医院肾科,重庆 400038;第三军医大学新桥医院泌尿外科,重庆 4000372.第三军医大学西南医院肾科,重庆 4000383.第三军医大学新桥医院泌尿外科,重庆 4000374.第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆 400038
摘要：目的构建HSP70真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应中HSP70作用及机制研究.方法用肝癌细胞系HepG2,用RT-PCR方法扩增HSP70cDNA,并利用T载体作为过渡,将HSP70基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中.重组质粒转染NIH3T3细胞,Western-blot法鉴定重组质粒HSP70/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达.结果 RT-PCR方法正确地扩增出了全长HSP70基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP70基因克隆完全正确.重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECL-Western-blottimg法证实了目的基因能在其中正确表达.结论成功地克隆真核表达重组质粒HSP70/pAAV-MCS,为下一步研究HSP70在肾脏缺血预适应的作用及其机制打下基础.
关键词：HSP70缺血预适应真核表达质粒肾脏
分类号：R692.5(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 201-204 )
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