人ICOSIg的真核表达及其对MLR反应的影响
许雪青1
白云1
王丰2
黎万玲3
杨晓亚1
王艳艳1
1.第三军医大学,分子遗传学教研室,重庆,4000382.第三军医大学,西南医院检验科,重庆,4000383.第三军医大学,全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的构建人ICOSIg基因的真核表达载体,表达并鉴定ICOSIg蛋白,初步研究其对MLR中细胞增殖以及对IL-10分泌的影响.方法从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法扩增ICOS胞外区cDNA编码基因,并和人IgGIFc基因一起装入真核表达载体pcDNA3中,采用脂质体转染COS-7细胞,G418筛选,用ELISA检测其表达情况,经蛋白A亲和纯化,用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.进一步通过3H-TdR掺入法和夹心ELSIA法探讨其对双向MLR反应中细胞增殖以及对IL-10分泌的影响.结果酶切和测序证实构建的ICOS膜外区和人IgG1Fc段基因序列正确、阅读框完整;ELISA、SDS-PAGE、Western blot验证ICOSIg的正确表达;功能实验提示ICOSIg能抑制MLR中的细胞增殖和IL-10的分泌.结论成功构建并表达了ICOSIg,而获得的ICOSIg能抑制MLR.
关键词：ICOSIg共刺激分子混合淋巴细胞反应
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30271246)国家自然科学基金(30300170)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 269-272 )
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