戊型肝炎病毒结构蛋白p166在家蚕细胞及蛹体中的表达
杨瑞丽1
王文兵2
孟继鸿1
1.东南大学医学院病原生物学和免疫学系,南京,2100092.江苏大学生命科学研究院,江苏,镇江,212013
摘要：目的探讨戊型肝炎病毒结构蛋白基因片段p166(HEVp166)在家蚕/BmNPV表达载体系统中的表达水平.方法应用PCR、基因克隆及共转染等技术将p166插入到家蚕杆状病毒多角体启动子的下游,构建重组病毒;并在家蚕细胞及家蚕蛹中表达p166.用间接免疫荧光试验检测感染36 h后家蚕培养细胞中p166蛋白的表达情况.收集感染后144 h的蛹样品进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecylsulphate-Polyacrylamide gel electrophoreses,SDS-PAGE)及Western blotting分析.结果获得含有HEVp166基因片段的重组杆状病毒表达载体Bm-HEV166.Bm-HEV166能在家蚕细胞中表达p166蛋白,感染后的培养细胞中出现绿色球状体;感染Bm-HEV166的家蚕蛹血淋巴能高效表达p166蛋白,蛹血淋巴能与抗p166单克隆抗体发生特异性反应,在Mr为19 000大小的位置出现一条明显的杂交条带.结论HEVp166基因片段在家蚕蛹中能获得高效表达,为进一步研制HEV口服疫苗奠定基础.
关键词：戊型肝炎病毒家蚕/BmNPV表达载体系统表达间接免疫荧光
分类号：R512.6(传染病)
资助基金：江苏省自然科学基金(BK2002053)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 288-291 )
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