人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的人工合成及高效表达
徐霞1
杨能1
涂洪斌2
1.广州医学院,检验系,广州,5101822.广州医学院,实验医学研究中心,广州,510182
摘要：目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达.方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技术将其插入温控型表达载体pBV220,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,构建cTnI基因的非融合表达菌hcTnI-pBV220/DH5α,热激后诱导非融合蛋白的表达,用单克隆抗体检测特异性hcTnI蛋白表达.结果序列分析表明克隆载体中的cTnI人工基因与设计相符,双酶切电泳结果证明表达载体构建成功,经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量(Mr)约24000,凝胶密度扫描约占菌体总蛋白的25%,能与cTnI单克隆抗体特异性结合.结论成功获得cTnI人工基因,构建了cTnI基因原核表达载体并获得了高效表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用奠定了基础.
关键词：肌钙蛋白Ⅰ密码子偏爱性克隆表达
分类号：Q51(蛋白质)
资助基金：广东省医药卫生科研项目(A2000265)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 320-322,326 )
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