应用噬菌体随机肽库技术筛选SARS-CoV S蛋白模拟表位
张小萍
王靖雪
魏静
万瑛
吴玉章
1.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000382.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000383.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000384.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000385.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要:目的筛选SARS病毒(Severe acute respiratory syndrome associated coronavirus,SARS-CoV)结构蛋白D(Spike)特异性的模拟表位,为抗SARS疫苗研究提供基础.方法以抗SARS病毒D蛋白的单克隆抗体为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,随机挑选30个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附(ELISA)法和交叉反应实验鉴定阳性克隆,再进行DNA序列分析和竞争抑制结合实验,以确定SARS病毒D蛋白的模拟表位.结果经噬菌体富集后,从随机挑选的30个克隆中得到了29个编码8种12肽的阳性克隆,8条肽与D蛋白的320~350氨基酸序列有较高同源性,确定Y/F、W、E和K氨基酸残基为模拟表位的骨架结构.结论用噬菌体12肽库成功筛选到了SARS病毒D蛋白的模拟表位,为基于D蛋白的肽疫苗研制提供了基础.
关键词:SARS病毒D蛋白模拟表位噬菌体肽库
分类号:R392(医学免疫学)
资助基金:教育部科学技术研究项目(30490240)国家重点基础研究发展计划(973计划)(30325020)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 442-444,452 )
英文信息展开
免疫学杂志

免疫学杂志

北大核心CSTPCD
ISSN:1000-8861
年,卷(期):2005,21(6)
所属栏目:基础免疫学