利用乳糖化羧甲基壳聚糖构建小鼠OX40转基因细胞株
原江水
冯永堂
王菲
宫伟雁
邸大琳
任杰
苗乃法
1.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610422.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610423.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610424.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610425.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610426.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,2610427.山东省潍坊医学院分子免疫学实验室,山东,潍坊,261042
摘要：目的利用乳糖化羧甲基壳聚糖(Lac-CMCS)构建小鼠OX40转基因细胞株,探讨Lac-CMCS在HepG2细胞定向转染中的可行性.方法从Con A活化的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体,测序证实后构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体,利用Lac-CMCS与载体偶联靶向性转染HepG2细胞,G418筛选,RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株.结果pUCm-T-OX40和pIRES2-EGFP-OX40经PCR、酶切和测序分析,证实插入的目的片段与GenBank记载的小鼠OX40 cDNA序列完全一致.利用Lac-CMCS能将小鼠OX40靶向转染HepG2细胞并获得表达;经G418筛选后获得稳定表达小鼠OX40的细胞株.结论利用Lac-CMCS能够成功将OX40靶向转染入HepG2细胞中.
关键词：OX40绿色荧光蛋白表达载体乳糖化羧甲基壳聚糖
分类号：R392(医学免疫学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 162-164 )
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