HCV NS3蛋白单克隆抗体的制备及其识别区域的分析
杨敬
薛小平
尹文
雷迎峰
吕欣
韦三华
胡兴斌
孙梦宁
徐志凯
1.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100322.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100323.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100324.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100325.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100326.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100327.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100328.第四军医大学微生物学教研室,西安,7100329.第四军医大学微生物学教研室,西安,710032
摘要：目的制备针对丙型肝炎病毒(HCV)非结构区NS3全长蛋白的单克隆抗体(MAb),并分析获得的单抗识别表位所在区域,为建立以NS3蛋白为靶位的抗HCV研究提供抗体工具.方法用原核表达的HCV 非结构区NS3全长蛋白作为免疫原,采用小鼠腹股沟皮下NC膜包埋法免疫小鼠,按常规杂交瘤细胞的制备方法,经细胞融合、克隆化制备抗NS3 蛋白的MAb.用间接免疫荧光法和Western blot鉴定其特异性.分别构建NS3丝氨酸蛋白酶(NS3蛋白的N末端1/3)编码基因的真核表达质粒pcDNA3.1(-)-ns3p、NS3解旋酶(NS3蛋白的C末端2/3)编码基因的真核表达质粒pcDNA3.1(-)-ns3h,将其瞬时转染COS-7细胞后,以获得的单克隆抗体作为一抗,通过免疫荧光分析获得单抗识别表位所在的区域.结果获得了2株抗NS3蛋白的单克隆抗体,这2株MAbs均特异识别NS3蛋白,并确定了它们的结合区域.结论获得了针对NS3蛋白的单克隆抗体,并对其单抗识别表位所在的区域进行了分析,为下一步进行以NS3蛋白为靶位的抗HCV研究奠定了良好的基础.
关键词：丙型肝炎病毒非结构区NS3蛋白单克隆抗体丝氨酸蛋白酶解旋酶
分类号：R373.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 402-405 )
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