重组人DcR3腺相关病毒的构建和表达
王槐志1
黎万玲2
董家鸿1
倪兵2
吴玉章2
1.第三军医大学,西南医院全军肝胆外科研究所,重庆,4000382.第三军医大学,基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的 克隆人DcR3基因于腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体pAAV-IRES-hrGFP中,以获得高感染滴度及纯度的重组人DcR3腺相关病毒,为将其用于感染移植肝,研究其对大鼠移植肝的保护作用打下基础.方法 用基因重组的方法构建含全长人DcR3基因的重组腺相关病毒骨架质粒,利用脂质体法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞AAV-293细胞中,合成重组DcR3腺相关病毒,经PEG/氯仿纯化,用SDS-PAGE鉴定其纯度,扫描电镜观察病毒颗粒形态,倍比稀释法测定重组病毒的感染滴度.并用重组病毒感染COS-7细胞鉴定DcR3的表达.结果 正确构建组装重组人DcR3腺相关病毒,纯化后病毒感染滴度为1.1×1010U/mL.在重组DcR3腺相关病毒感染的COS-7细胞上清液中检测到了DcR3的表达.结论 成功构建了重组人DcR3腺相关病毒,为下一步研究DcR3对大鼠移植肝的保护作用打下基础.
关键词：基因DcR3腺相关病毒
分类号：R394.6(医学遗传学)R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30400418)重庆市自然科学基金(CSTC;2005BA5004)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 487-490 )
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