采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株
童俊容1
刘明2
刘春志2
童光志2
陈政良1
1.南方医科大学免疫学教研室,广州,5105152.中国农业科学院哈尔滨畜医研究所,畜医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
摘要:目的 构建重组H5亚型禽流感疫苗株.方法 采用RT-PCR技术,分别扩增鹅源高产禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/ QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亚型参考株A/Duck/Germany/1215/73(H2N3)的神经氨酸酶(NA)基因,并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)的编码序列进行缺失与修饰,然后分别构建这8个基因的转录与表达载体,将其共转染293T/MDCK混合培养细胞单层,对拯救出的重组病毒进行表型分析.结果 利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株,其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列,疫苗株的表型为H5N3.结论 构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3,为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础.
关键词:禽流感病毒反向遗传学疫苗株
分类号:Q78(基因工程(遗传工程))
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 519-522,526 )
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