HCV复合多表位抗原基因的克隆表达及其免疫学特性分析
韦三华
尹文
胡兴斌
雷迎峰
杨敬
吕欣
孙梦宁
徐志凯
1.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100322.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100323.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100324.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100325.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100326.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100327.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,7100328.第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,710032
摘要：目的 构建丙型肝病炎病毒(HCV)截短C基因和多表位基因重组原核表达质粒,表达纯化融合蛋白,分析其免疫原性和抗原性.方法 PCR方法扩增核心区羧基端部分缺失的基因片段Ct;合成HCV E2区模拟表位与NS3～NS5 7个表位基因Em;分别将Ct、Em克隆入原核表达质粒pQE30,筛选阳性重组质粒pQE30-CtEm,转化E.coli M15,IPTG诱导融合蛋白表达,薄层扫描分析表达蛋白;可溶性分析后用Ni2+-NTA凝胶亲和层析柱纯化、透析并浓缩融合蛋白;Western blot分析纯化蛋白的特异性和抗原性;纯蛋白免疫小鼠后分析其免疫原性.结果 成功构建了HCV复合多表位抗原基因的原核表达质粒pQE30-CtEm,目的基因可高效表达,表达产物主要以包涵体形式存在,Ni2+-NTA纯化可获得目的蛋白,纯化蛋白具有良好的抗原性和免疫原性.结论 HCV复合多表位抗原基因融合蛋白可高效表达并得到纯化,该融合蛋白可作为HCV诊断抗原,也为丙型肝炎新型疫苗的研究提供了靶抗原.
关键词：丙肝肝炎病毒融合蛋白原核表达疫苗
分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30371280)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 652-655 )
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