人源抗HBs基因工程抗体在E. coli中的高效表达与折叠研究
刘雪林
宋宏彬
唐晓敏
李申龙
胡小华
1.军事医学科学院疾病预防控制所,北京,1000392.军事医学科学院疾病预防控制所,北京,1000393.军事医学科学院疾病预防控制所,北京,1000394.军事医学科学院疾病预防控制所,北京,1000395.军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100039
摘要：目的 高效表达是基因工程抗体走向临床的关键问题之一.本试验旨在研究人源抗HBs基因工程抗体在E. coli中的高效表达与折叠.方法 本实验将抗HBsAg抗体的轻链(L)和重链Fd段基因,分别克隆于pET20b质粒中并分别转化到大肠肝菌BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE分析发现在Mr27 000(L)和Mr25 000(Fd)处有外源蛋白表达,表达蛋白含量分别为53%和48%.L链和Fd 包涵体蛋白经盐酸胍变性后,等量混合于折叠液中.结果 L和Fd可复性形成了Mr约50 000的蛋白,ELISA结果表明,复性蛋白具有与HBsAg结合的能力.结论 抗HBsAg抗体Fab段在大肠杆菌中的表达与复性的成功,表明包涵体表达基因工程抗体在技术是可行的.
关键词：抗HBsAgFab段表达复性
分类号：R349.83(基础医学)
资助基金：北京市自然科学基金(7002033)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 38-39,45 )
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