应用肺癌细胞系诱生肿瘤特异性T细胞的初步研究
邓波
林一丹
王如文
蒋耀光
徐银祥
1.重庆第三军医大学大坪医院全军胸外科中心,重庆,4000422.重庆第三军医大学大坪医院全军胸外科中心,重庆,4000423.重庆第三军医大学大坪医院全军胸外科中心,重庆,4000424.重庆第三军医大学大坪医院全军胸外科中心,重庆,4000425.重庆第三军医大学大坪医院全军胸外科中心,重庆,400042
摘要:目的 探讨通过构建表达人白细胞抗原(HLA)HLA-A2的肺癌细胞系以诱生肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL).方法 将编码HLA-A2基因的质粒pcDNA3.1D/V5转染人肺腺癌A549细胞,得到能够稳定表达HLA-A2的肺腺癌细胞系.将其用丝裂霉素(MMC)处理后,行混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(mixed lymphocyte tumor cell culture,MLTC)以诱导HLA-A2+的健康人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte, PBL)产生肿瘤特异性CTL,并通过特异性杀伤实验、单克隆抗体阻断实验、淋巴细胞增殖实验进行检验.结果 HLA-A·0201基因在A549细胞中的瞬时与稳定表达率分别为0.32、0.91.成功获得稳定表达HLA-A2的A549细胞株.MLTC诱导最终产生4组T淋巴细胞,且符合肿瘤特异性CTL的形态学特征与大量增殖的特点,但CTL杀伤实验和单克隆抗体阻断实验结果示肿瘤细胞未被有效杀伤,可能与肿瘤特异性CTL的数量较少及活性较低有关.结论 本研究通过构建表达HLA-A2的肺癌细胞系,对建立肿瘤特异性CTL模型作了初步探讨,为进一步完善肺癌特异性CTL细胞模型并为研究肿瘤免疫逃避、免疫耐受及反杀伤淋巴细胞等生物学行为打下基础.
关键词:人白细胞抗原细胞毒性T淋巴细胞混合淋巴细胞肿瘤细胞共培养
分类号:R730.45(一般性问题)
资助基金:国家自然科学基金(30400440)教学改革项目(20050030)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 40-45 )
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