晚期糖化终产物受体反义 RNA 腺相关病毒载体的构建及在肾脏系膜细胞中表达
游捷1
赵蓉2
刘礼斌3
林建银2
1.福建省内分泌研究所,福州,350001;福建医科大学分子医学研究中心,福州,3500012.福建医科大学分子医学研究中心,福州,3500013.福建省内分泌研究所,福州,350001
摘要：目的 构建晚期糖化终产物受体(RAGE)反义RNA腺相关病毒载体,并在大鼠肾脏系膜细胞中表达. 方法 构建腺相关病毒介导的RAGE反义RNA载体,3个质粒共转染293细胞,获得病毒原液,感染大鼠肾脏系膜细胞,流式细胞术、RT-PCR、ELISA检测重组病毒感染的细胞RAGE的表达和分泌细胞外基质的情况.结果 经酶切鉴定、序列分析显示RAGE基因片段正确完整反向插入pAAV-MCS.利用293细胞包装获得病毒原液的滴度为8.7×107VP/mL.感染重组病毒的细胞与正常细胞比较RAGE表达被抑制(48.2±6.1)%,分泌Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平明显下降(P＜0.05).结论 成功构建具有抑制功能的RAGE反义RNA腺相关病毒载体,为进一步研究RAGE的作用机制,以及基因治疗RAGE相关疾病提供一个重要工具.
关键词：反义RNA晚期糖化终产物受体腺相关病毒
分类号：R494.3(康复医学)
资助基金：福建省科技攻关计划(2003D09)福建省卫生厅青年科研课题(2004-1-1)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 135-138,143 )
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