携带 EGFPC3 质粒的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌在小鼠体内的表达
方希修1
王冬梅2
唐现文2
刘建文3
1.江苏畜牧兽医职业技术学院营养与生物技术研究室,江苏,泰州,225300;江南大学食品学院食品营养与安全研究所,教育部工业生物技术重点实验室,江苏,无锡,2140362.江南大学食品学院食品营养与安全研究所,教育部工业生物技术重点实验室,江苏,无锡,2140363.江苏畜牧兽医职业技术学院营养与生物技术研究室,江苏,泰州,225300
摘要：目的 构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X8786/pEGFP-C3,检测增强型绿色荧光蛋白C3(EGFP-C3)在小鼠体内荧光表达.方法 将质粒pEGFP-C3电转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门菌X8786(pEGFP-C3),分别灌胃饲服昆明种小鼠,流式细胞仪检测脾脏细胞荧光表达,利用荧光显微镜检测小鼠组织荧光表达.结果 在体外稳定试验中,重组菌经LB固体及液体培养基连续传15代后,单个菌落和菌液均呈绿色;流式细胞仪结果证实,体外情况下,减毒鼠伤寒沙门菌可以将pEGFP-C3转入小鼠腹腔灌洗巨噬细胞,并在其中表达.在体内稳定试验中,经昆明种小鼠连续传代10次,从肝脏、脾脏中分离的细菌经LB固体培养仍为绿色,证明构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌是稳定的.用免疫剂量的重组细菌接种昆明种小鼠后,观察1个月未见有异常现象,同时剖检后也未见脏器有眼观病变.免疫一定时间后,在小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠、肌肉等组织有荧光表达.结论 表达EGFP-C3的重组鼠伤寒沙门氏菌的成功构建为减毒沙门氏菌作为活载体的基因工程疫苗研制提供一个优良模型.
关键词：增强型绿色荧光蛋白C3重组减毒鼠伤寒沙门氏菌荧光表达
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 180-183 )
英文信息