人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 N端片段的原核表达
蔡学敏
左大明
赵娜
张丽芸
陈政良
1.南方医科大学免疫学教研室,广州,5105152.南方医科大学免疫学教研室,广州,5105153.南方医科大学免疫学教研室,广州,5105154.南方医科大学免疫学教研室,广州,5105155.南方医科大学免疫学教研室,广州,510515
摘要：目的 在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段.方法 应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与MBL-CLR结合的活性.结果 从pGEM-MASP2中扩增得到约840 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4 900 bp和840 bp片段,测序结果与预期的完全一致.纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr 60 000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR蛋白结合.结论 获得了表达人MASP2 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP2N端片段/GST融合蛋白,为MASP2分子的进一步研究提供了条件.
关键词：甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段原核表达
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30371310)广东省自然科学基金(015003)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 235-238 )
英文信息