肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定
侯瑞
饶贤才
陈志瑾
杨杰
胡晓梅
丛延广
谭银玲
胡福泉
1.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000382.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000383.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000384.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000385.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000386.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000387.第三军医大学微生物学教研室,重庆,4000388.第三军医大学微生物学教研室,重庆,400038
摘要：目的 构建表达人源肽抗生素hPAB-β的重组毕赤酵母,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法 用PCR及引物延伸法得到天然及优化的hPAB-β序列,克隆入pPIC9K质粒,转化DH5α大肠埃希菌,用酶切和核苷酸测序鉴定.重组质粒经SalⅠ酶线性化,整合入毕赤酵母GS115中,在DNA,mRNA及蛋白水平鉴定阳性重组子.结果 构建的含天然及优化序列的重组质粒酶切均可得到相应大小的插入片段,与预期相符,测序结果表明序列和阅读框均正确.线性化的重组质粒转入GS115后,得到7个不同的高拷贝阳性转化子,均能表达重组肽并具有良好的抑菌活性.结论 本研究成功构建含天然及优化hPAB-β序列的重组毕赤酵母工程菌,能够用于肽抗生素hPAB-β的制备.
关键词：肽抗生素hPAB-β毕赤酵母表达鉴定
分类号：R978.1(药品)Q784(基因工程（遗传工程）)
资助基金：军队攻关项目(06G075)重庆市科技攻关项目(CSTC.2005AB5201)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 277-282 )
英文信息