铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38KDEL的原核表达载体构建及其鉴定
张琴1
李明远1
张林2
蒋忠华1
祁志荣1
李虹1
1.四川大学,基础医学与法医学院微生物学教研室,成都,6100412.四川大学,华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041
摘要：目的 构建铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定.方法 采用PCR方法扩增本实验所需要的PE38KDEL基因片段,再通过酶切及连接反应构建原核表达载体pGEX-4T-1-PE38KDEL,重组载体经过限制性内切酶酶切、PCR扩增鉴定及DNA序列测定证实插入片段正确后,转化感受态大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳后及蛋白免疫印迹法分别测定其大小和特异性.结果 经鉴定证实原核表达载体pGEX-4T-1-PE38KDEL构建成功,且在大肠杆菌BL21中获得了PE38KDEL与GST的融合表达,且表达蛋白产物的分子质量大小与预期值一致,并可被PE的特异性抗体所识别.结论 PE38KDEL在大肠杆菌中获得了高效的融合表达,为下一步研究其功能奠定了基础.
关键词：铜绿假单胞菌外毒素PE38KDEL原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30470613)高等学校博士学科点专项科研基金(20040610053)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 291-294 )
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