小鼠MIP-1α-DT390重组免疫毒素原核表达载体的构建及鉴定
吕梅励1
李虹2
梁伟波1
李明远2
蒋忠华2
贾怡1
陈文捷1
张林1
1.四川大学华西基础医学与法医学院法医物证教研室,成都610041;四川大学生物治疗国家重点实验室,成都6100412.四川大学华西基础医学与法医学院法医物证教研室,成都610041
摘要：目的 构建小鼠MIP-1α基因和白喉杆菌外毒素DT390基因的原核融合表达载体,诱导并鉴定该蛋白的表达.方法 通过RT-PCR获得mMIP-1α基因,通过PCR扩增质粒SPα-DT390获得DT390基因,酶切、连接,构建原核表达载体pET-32a(+)-mMIP1-1α-DT390,重组质粒证实构建成功后,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导融合蛋白表达,并用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法鉴定.结果 成功构建了mMIP-lα与DT390基因的原核融合表达载体pET-32a(+)-mMIP-Iα-DT390,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达蛋白的相对分子质量与预期值一致,并可被抗mMIP-1α和抗白喉毒素的特异性抗体所识别.结论 获得了mM皿1α与DT390融合基因在原核系统中的稳定表达,为研究其临床应用奠定了基础.
关键词：MIP-1α白喉杆菌外毒素重组免疫毒素原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2002AA214101)国家自然科学基金(30221001)四川省应用基础研究计划(04JY029-002)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 362-365 )
英文信息