新型抗病毒蛋白CVN的构建及原核表达
刘玉生1
李昌1
金宁一2
于芳3
金洪涛2
1.吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,1300622.军事医学科学院军事兽医研究所,长春,1300623.军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;长春理工大学生命科学技术学院,长春,1313000
摘要：目的 构建重组抗病毒蛋白CVN原核表达载体,并进行表达和鉴定.方法 采用全基因合成的方法合成目的 基因CVN(Cyanovirin-N),将该片断插入到pBluescript II SK(+)载体中后,亚克隆至原核表达载体pET28a(+),构建pET-CVN表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),WIG诱导表达.用SDS-PAGE,Westem-blot等方法分析鉴定表达产物.结果 合成的目的 基因全长303bp,重组载体pET-CVN经PCR和双酶切鉴定,证实构建成功.将其导人大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物相对分子量为17 000左右,与理论预期值完全相符.凝胶成像分析表明最高表达量可占菌体总蛋白的46.4%.SDS-PAGE,Westem-blot分析表明目的 蛋白得到了很好的表达.结论 成功构建了pET-CVN原核表达载体,并得到了大量的表达,为进一步研究其生物学功能奠定了坚实的基础.
关键词：抗病毒蛋白原核表达Cyanovirin-N
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：吉林省应用基础研究项目(20060570)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 395-398 )
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