溶藻弧菌抗独特型抗体scFv的原核表达及免疫原性鉴定
付建芳1
夏永娟2
秦红2
王世鄂2
金晓航2
初晨宇2
黄威权2
1.第四军医大学,西京医院内分泌科,西安,7100322.第四军医大学,组织胚胎学教研室,西安,710032
摘要：目的 构建溶藻弧菌抗独特型单链抗体(scFv)的原核表达载体,并对其表达的蛋白进行免疫原性鉴定.方法从分泌溶藻弧菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中已获得的该抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过基因重组构建scFv及原核表达载体pET32a-AL,转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达.表达后的重组蛋白利用动物免疫试验进行免疫原性鉴定.结果 scFv基因序列全长747碱基对,编码249个氨基酸,符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有框架区(FRs)、抗原互补决定区(CDRs)及抗体特征性的半胱氨酸残基.ELISA测定和动物免疫试验显示抗独特性抗体的scFv具有藻弧菌一样的免疫原性.结论 成功构建了抗溶藻弧菌独特型抗体scFv原核表达载体并表达于包涵体中,表达的融合蛋白具有与溶藻弧菌一样的免疫原性,为溶藻弧菌抗独特型单链抗体scFv成为鱼用基因工程疫苗奠定了初步基础.
关键词：溶藻弧菌单链抗体原核表达免疫原性基因工程疫苗
分类号：Q812.3(生物工程学(生物技术))
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA622040)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 478-481 )
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