H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒构建
陈义锋1
金宁一
贾雷立2
鲁会军3
南文龙1
田明尧1
陈晓月1
马海利1
马鸣潇1
刘成宏1
1.吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;中国人民解放军军事医学科学院11所,全军基因工程重点实验室,长春,1300622.军事医学科学院疾病预防所,北京,1000713.吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
摘要：目的 构建表达H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒活载体疫苗候选株.方法 筛选流感病毒主要抗原(HA NA NP M)优势抗原表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构合成流感多表位基因(Epi),以H5、H7 HA融合表达基因为骨架,将多表位基因插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至鸡痘病毒表达载体pUTA-2复合启动子(ATI-P7.5×20)下游,构建重组鸡痘病毒中间转移载体pUTA-2-H7HA-Epi-H5HA.应用脂质体介导的转染法,将该重组鸡痘病毒中间转移载体与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经BrdU进行3次加压筛选挑斑纯化后传代,并对重组以鸡痘病毒进行PCR和IFA检测和Western blot分析.结果 成功构建了重组鸡痘病毒中间转移载体pUTA-2-H7HA-Epi-H5HA,PCR、IFA和Western blot检测阳性.结论 筛选出稳定共表达H5H7HA基因和通用多表位基因的重组鸡痘病毒vUTA2-H7HA-Epi-H5HA株,该重组鸡痘病毒的构建为跨种通用型流感病毒活载体疫苗的研究奠定了物质基础.
关键词：重组鸡痘病毒多表位基因(Epi)构建
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：教育部科学技术研究项目(306006)吉林省科技发展计划(20065020)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 524-527 )
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