抗HIV-1 gp120单链抗体和白喉毒素融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达
于芳1
金宁一2
李昌3
刘玉生3
佟敬山1
胡宁宁2
金洪涛3
1.军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室,长春,130062;长春理工大学生命科学技术学院,长春,1300222.军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室,长春,1300623.军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室,长春,130062;吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
摘要：目的 构建人源抗HIV-1单链抗体和白喉毒素融合基因的原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达重组蛋白.方法通过PCR扩增,获得目前应用较多的DAB389基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot方法分析鉴定.结果酶切及DNA序列测定鉴定正确.SDS-PAGE和Western Blot分析证实,重组质粒可表达出相对分子质量为75 200的蛋白,与DT-hs120融合基因子量一致,其表达量约占菌体总蛋白的21%,表达形式主要为包涵体.结论 成功构建了DT-hS120表达载体,并获得了高效表达.
关键词：HIV-1单链抗体基因克隆原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：吉林省科技厅科研项目(20060570)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 531-534 )
英文信息