荔枝果实中profilin的表达纯化及其与桦树花粉Bet v 2的交叉反应性研究
张红云
宋娟娟
刘志刚
康敏雄
1.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,5180602.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,5180603.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,5180604.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,518060
摘要:目的 表达和纯化荔枝果实profilin,并对其免疫学活性及交叉反应性进行研究.方法采用RT-PCR获得整个荔枝profilin的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性,并通过ELISA抑制实验对其与桦树花粉profilin的交叉反应性进行研究.结果成功的构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量的表达了荔枝profilin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示15个荔枝过敏患者中有5个存在重组pofilin的特异性IgE抗体.ELISA抑制实验发现它们之间存在很高的交叉反应性.结论 成功的表达了荔枝profilin,经纯化后具有很好的免疫学活性,为进一步的深入研究奠定了基础.
关键词:荔枝profilin基因表达纯化交叉反应性
分类号:R392.8(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(30070702)广东省科技厅重点科技项目(2003A3080502)教学改革项目(2005028)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 541-544 )
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