人源Fab抗体库的构建和抗HBsAg抗体的筛选和鉴定
焦永军1
周镇先2
曾晓燕1
赵红2
薛蓉2
管晓虹3
冯振卿3
朱凤才1
史智扬1
1.江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京,2100092.江苏省南京市第二医院,南京,2100033.南京医科大学,卫生部抗体技术重点实验室,南京,210029
摘要：目的 构建人源Fab抗体文库,筛选抗HBsAg 抗体片段并进行初步鉴定.方法 收集20份临床检验废弃的成人乙肝感染者淋巴细胞,抽提总RNA ,逆转录成cDNA,构建抗乙肝病毒人源免疫型Fab抗体文库.以HBsAg包板进行4轮循环的吸附-洗脱-扩增,挑单克隆用Phage-ELISA、DNA测序筛选阳性克隆,对阳性克隆进行可溶性表达,并用ELISA对其特异性进行鉴定.结果 构建的人源Fab型抗体文库的库容为2.0×108,并具有良好的多样性.经过4轮筛选,成功获得4株能与HBsAg结合的人源抗体克隆,分别命名为hFabHB1、hFabHB2、hFabHB3 和hFabHB4.对其中的hFabHB1进行可溶性表达,ELISA鉴定阳性.结论 成功构建了抗乙肝病毒人源免疫型Fa b抗体文库,从中筛选获得的4株人源Fab抗体片段有望在乙型肝炎的预防和治疗上发挥作用 .
关键词：人源Fab抗体文库乙型肝炎病毒表面抗原筛选
分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：南京市科委社会发展项目(200502016)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 61-64,68 )
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