联合应用配体和单克隆抗体亲和层析纯化人血浆天然MBL蛋自
王明永1
张丽芸2
张雅妮2
雷鸣2
刘莹2
陈政良2
1.南方医科大学免疫学教研室,广州510515;新乡医学院医学检验系,河南,新乡,4530032.南方医科大学免疫学教研室,广州,510515
摘要:目的 优化从人血浆分离纯化天然甘露聚糖结合凝集素(MBL)的方法.方法 联合应用甘露聚糖-Sepharose4B层析柱和抗人MBL-CRD单克隆抗体-Sepharose 4B层析柱,3次上柱亲和层析分离,分别用EDTA、D-甘露糖、Gly-HCI(pH 2.4)溶液洗脱结合蛋白.以SDS-PAGE、Western blot和ELISA等技术鉴定纯化产物.结果 所获纯化MBL为Mr28 000和Mr32 000肽链构成的功能性寡聚体,其纯度较高,可与配体甘露聚糖结合并有效凝集酵母菌,还能与U937细胞胶凝素受体结合.结论 联合使用配体亲和层析和单克隆抗体亲和层析从血浆中分离纯化MBL,获得高纯度、高活性的天然MBL蛋白.
关键词:甘露聚糖结合凝集素配体单克隆抗体亲和层析
分类号:R392-33(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(30371310)广东省自然科学基金(015003)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 119-122,126 )
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