登革病毒2型非结构蛋白NS2B的原核表达、纯化及其抗体的制备
刘丽梅1
陈宗涛1
田衍平2
陈炜1
江雯1
徐小峰1
高娜2
安静3
1.第三军医大学基础医学部微生物学教研室,重庆,4000382.第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室,重庆,4000383.首都医科大学基础医学院微生物学教研室,北京,100069
摘要：目的 原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体.方法 RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体.采用ELISA检测抗体效价,Westem-blot及免疫荧光染色检测其特异性.结果 成功构建原核表达载体pQE-31/NS2B,进一步获得相对分子质量为16 000的纯化蛋白及多克隆抗体,EHSA显示抗体效价达1:25 600.Western-blot和免疫荧光染色显示多克隆抗体与NS2B蛋白特异性结合.结论 本研究获得了纯化的DV2 NS2B蛋白,成功地制备了NS2B多克隆抗体,为进一步研究NS2B的作用机制奠定了基础.
关键词：登革病毒Nonstructural Protein 2B(NS2B)原核表达载体纯化蛋白多克隆抗体
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30471552)国家自然科学基金(30640065)国家自然科学基金(30671853)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 135-138 )
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