三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体的构建及初步检测应用
杨新星
郝友华
丁红晖
宋娜
刘贽
陈玲
杨东亮
1.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300302.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300303.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300304.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300305.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300306.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,4300307.华中科技大学同济医院临床免疫研究室,武汉,430030
摘要：目的 体外构建三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体,并初步用该三种四聚体对抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)进行了初步检测.方法 原核高效表达的HLA-A*0201-BSP和β2m蛋白,分别和三种HBV抗原肽(HBVCore18-27,Env335-343,Po1575-583)体外复性折叠成可溶性的HLA-A*0201抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成相应的三种抗原肽四聚体.最后进行流式细胞仪检测.结果 Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了三种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体.构建的三种四聚体均可以检测到相应特异性的CTL,在自限性感染患者体内针对乙肝核心抗原(core18-27)的CTL细胞频数(0.18%)高于针对聚合酶抗原(po1575-583)(0.08%)和包膜抗原(env335-343)(0.06%).结论 成功构建了三种具有完整构象的生物素化HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体,所构建的三种四聚体都可以检测到抗原特异性的CTL.
关键词：HBV抗原肽-HLA-A*0201单体T淋巴细胞四聚体
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(213014CB510008)国家自然科学基金(30400412)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 146-149 )
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