HBV基因组各基因真核表达载体的构建及转染
汤玉瑜
陈永文
郭晟
吴玉章
1.第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,4000382.第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,4000383.第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,4000384.第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的 构建HBV基因组各基因真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系.方法 采用PCR方法,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBV基因的各基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用细胞流式技术及细胞免疫组化技术检测HBV各基因产物在细胞内的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/HBs、pcDNA3.1(+)/HBc、pcDNA3.1(+)/HBe、pcDNA3.1(+)/HBp、pcDNA3.1(+)/HB-preS1、pcDNA3.1(+)/HB-preS2、pcDNA3.1(+)/HBx真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的 基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染HepG2细胞系的建立为进一步研究各基因的功能奠定良好的实验基础.
关键词：HBV真核表达载体稳定转染的HepG2细胞系基因表达
分类号：R373.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(K0805110064)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 251-253,258 )
英文信息