pApoptin-EGFP真核表达载体的构建及其对膀胱肿瘤T24的促凋亡作用
王亚林
靳风烁
万江华
王洛夫
吴刚
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000422.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000423.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000424.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000425.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,400042
摘要：目的 构建真核表达质粒pApoptin-EGFP并探讨其对人膀胱肿瘤细胞株T24促凋亡作用.方法 采用PCR的方法从质粒p3×flag-Apoptin-myc扩增出野生Apoptin片段,将其定向克隆于pEGFP-N1载体的EcoRI和BamHI酶切位点,构建能表达Apoptin-EGFP融合蛋白的真核表达质粒pApoptin-EGFP,酶切、测序鉴定,RT-PCR、荧光显微镜分析Apoptin基因表达,脂质体介导瞬时转染膀胱肿瘤T24细胞,流式细胞仪检测凋亡及细胞周期变化.结果 成功构建pApoptin-EGFP重组质粒,并在被转染细胞中检测到Apoptin基因表达;瞬时转染后不同时相点均可检测到细胞凋亡,与空质粒组相比具有显著差异,细胞周期表现为G/G0期阻滞.结论 成功构建pApoptin-EGFP真核表达质粒,重组质粒能在T24细胞中顺利表达Apoptin-EGFP融合蛋白,重组质粒转染可诱导T24细胞凋亡并阻滞细胞周期于G1/G0期.
关键词：Apoptin膀胱肿瘤T24凋亡
分类号：R730.23(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(30571864)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 279-282 )
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