利用α-溶血素系统分泌表达重组人白介素-6
宁亚蕾1
周立雄2
张卫军1
鲁东水1
肖斌1
毛旭虎1
邹全明1
1.第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,4000382.重庆工学院生物工程学院生物制药系,重庆,400050
摘要：目的 构建基于大肠杆菌α-溶血素(HlyA)分泌机制的原核胞外分泌表达载体系统,将重组人白介素6(rhIL-6)分泌至胞外培养基中.方法 利用分子克隆手段,从引起人泌尿道感染的大肠杆菌UPEC J96菌株染色体上获得了α-溶血素(HlyA)系统的分泌功能基因,与外源基因片段hIL-6一起克隆至pQE30骨架载体,构建了胞外分泌表达质粒pIsQ,转化E. coliTop10,诱导表达后通过Western blot检测培养上清中hIL-6的表达.结果 获得了与设计完全一致的pISU载体,Western blot结果显示,可以在pISQ/E. coli Top10培养液上清中检测到与His-hIL6-HlyAs融合蛋白相对分子质量大小一致的特异条带.结论 大肠杆菌HlyA分泌系统操纵子能够在染色体和质粒间传递,rhIL-6能够通过该系统被特异地分泌至胞外培养基中,以可溶形式存在,为后续生物学研究奠定了基础.
关键词：人白介素6α-溶血素分泌系统hly操纵子胞外分泌表达
分类号：Q812(生物工程学(生物技术))
资助基金：国家自然科学基金(2006BA5024)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 380-384 )
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