CEA迷你基因原核表达及其诱导小鼠特异性淋巴细胞增殖的研究
李丹
方艳秋
谭岩
刘力华
段秀梅
许淑芬
1.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,1300212.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,1300213.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,1300214.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,1300215.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,1300216.吉林大学第一临床医院中心研究室,长春,130021
摘要：目的 在原核细胞中表达人癌胚抗原(CEA)的迷你基因短肽,纯化及鉴定目的 蛋白,并检测其在小鼠体内的抗原性.方法 利用PCR技术从人基因组中得到一段来源于CEA的DNA序列,其中包含两个编码分别能被HLA-DR4/9、HLA-DR53以及HLA-DR4/7/9型别的人群所识别辅助性T细胞(HTL)表位的迷你基因,构建重组表达质粒pQE30-CEA625-667,在大肠杆菌M15中诱导表达.Westren Blot杂交鉴定、镍凝胶亲和层析法纯化目的 蛋白.3H-TdR掺入法检测目的 短肽诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应.结果 CEA625-667短肽在大肠杆菌M15中以包涵体形式表达.Western-blot结果显示,在相对分子质量约6 700处有表达产物与6×his mAb特异性结合带.镍柱纯化后可得到纯化的目的 蛋白.3H-TdR掺入实验所得不同浓度的CEA625-667与小鼠脾细胞共孵育7～9 d后的刺激指数相继达到对照组的10倍以上.结论 成功诱导了CEA625-667短肽的原核表达,通过镍凝胶亲和层析法获得纯度较高的CEA625-667短肽,并证明在一定浓度下目的 短肽可于体外诱导小鼠的特异性淋巴细胞增殖.为CEA625-667迷你基因作为表位疫苗在抗肿瘤方面的进一步研究提供条件.
关键词：癌胚抗原迷你基因表位大肠杆菌特异性淋巴细胞增殖
分类号：R730(一般性问题)
资助基金：吉林省科技厅重点项目(20050402-3)长春市科技计划项目(2004218)吉林省科技厅重点项目(20040401-5)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 400-403 )
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