抗rhEndoglin单链抗体的可溶性表达、纯化及活性鉴定
赵泽文
梁志清
史常旭
常青
陈勇
1.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,4000382.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,4000383.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,4000384.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,4000385.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,400038
摘要：目的 研制抗rhEndoglin-scFv(single chain variable fragment)抗体.方法 将具有抗原结合活性的抗rhEndoglin.scFv噬菌体感染大肠杆菌E-coli HB2151,经IFIG诱导表达,SDS-PAGE和Westem Blot鉴定分析.用HiTrap Anti.E Tag柱亲和层析纯化scFv抗体,HiTrap Desahing柱行缓冲液更换.用间接ELISA测scFv抗体的亲和常数,用竞争性ELISA和间接免疫荧光检测scFv抗体的抗原结合活性.结果 成功诱导表达和纯化抗rhEndoglin-scFv抗体,表达产物主要位于周质腔中,相对分子质鼍约为2.9×104.测定scFv的亲和常数为(2.14±0.84)×107L/mol,它能与抗rhEndo~in单抗竞争性结合同一抗原表位,且竞争作用随scFv浓度增加而加强.间接免疫荧光实验证实该scFv抗体能识别HUVEC胞膜表达的Endnglin抗原.结论 制备的抗rhEndoglin-scFv抗体具有与rhEndoglin和天然Endoglin结合的能力,可望将其用作肿瘤诊断和治疗的靶向载体.
关键词：Endoglin单链抗体免疫活性
分类号：R392-33(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30271360)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 56-60 )
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