人SUMO-1基因原核表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定
宋振1
王劼1
安宁1
杨振1
雷鸣2
郭泽坤2
1.西北农林科技大学生命学院,陕西,杨凌,7121002.西北农林科技大学生命学院,陕西,杨凌,712100;陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100
摘要：目的 构建人SUMO-1基因的原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备兔抗人SUMO-1抗血清.方法 从质粒pcDNA-HA-SUMO1-GG中用PCR方法克隆到编码人SUMO-1 N端97个氨基酸的基因片段,构建了SUMO-1原核表达载体pET41a(+)-SUMO1,转化大肠杆菌B121(DE3)pLysS,IPTG诱导蛋白表达并利用GST亲和层析柱进行纯化,以纯化后的融合蛋白GST-SUMO1为抗原免疫家兔,获得抗血清.Western blotting、ELISA法鉴定获得的抗血清.结果 成功构建原核表达载体,纯化到融合蛋白GST-SUMO1,用纯化的融合蛋白免疫家兔制备了多克隆抗体,Western blotting、ELISA法证实多克隆抗体制备成功.结论 成功获得了人SUMO-1多克隆抗体,为进一步研究人SUMO-1蛋白的功能奠定了基础.
关键词：人SUMO-1原核表达蛋白纯化多克隆抗体
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：陕西省科技创新工程科技重大专项(13115;2008ZDKG-68)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 125-129 )
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