重组腺病毒载体vAd-tat的构建及其在细胞中的表达
王路1
白雪1
刘红亮1
张高红2
郑永唐2
1.中国科学院昆明动物研究所,动物模型和人类疾病机理重点实验室,分子免疫药理学实验室,昆明,650223;中国科学院研究生院2.中国科学院昆明动物研究所,动物模型和人类疾病机理重点实验室,分子免疫药理学实验室,昆明,650223
摘要：目的 构建含HIV-1 tat基因重组腺病毒,观察在不同细胞中外源蛋白Tat的表达,作为DC抗HIV疫苗的基础.方法 通过PCR扩增,获得HXB2 tat的cDNA片段,定向克隆入腺病毒转移载体pTrack-CMV,线性化后转化含有腺病毒骨架pAd-easy-1的大肠杆菌BJ5183,获得同源重组的质粒prAd-tat,Pac Ⅰ酶切纯化后转染293细胞,包装成具有感染力的复制缺陷型重组腺病毒vAd-tat.结果 经PCR、酶切及DNA序列测定,插入片段大小、方向正确,获得具有感染力的含有HIV-1 tat基因的重组腺病毒;通过Western blot方法 检测,重组腺病毒在293细胞中表达出Mr,为15 000的蛋白.结论 成功构建了含有HIV-1 tat基因的腺病毒,并观察到该基冈在细胞中的表达.
关键词：HIV-1tat293细胞腺病毒基因克隆
分类号：R363(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(30471605)云南省科技攻关计划(2004NG12)中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX1-YW-R-15)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 168-172 )
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