人BclGL基因慢病毒表达载体构建及其对T淋巴细胞凋亡的影响
罗娜1
吴毅2
费蕾3
郭晟3
杨承英3
吴胜昔3
陈永文3
吴玉章3
郝飞1
1.第三军医大学,西南医院皮肤科2.第三军医大学,基础部解剖教研室3.第三军医大学,基础部全军免疫学研究所
摘要：目的 构建针对人BclGL的慢病毒表达载体,检测其对Jurkat T淋巴细胞系凋亡的影响,为进一步研究BclGL在细胞内信号转导及分子功能奠定基础.方法 RT-PCR方法扩增人全长BclGL基因,克隆于pGrP-N1质粒中构建BclGL绿色荧光蛋白融合基因(BclGL-GFP),将融合基因克隆于慢病毒载体FUGW并转染293FT细胞包装浓缩慢病毒颗粒.将浓缩慢病毒感染Jurkat细胞,同时设立PBS对照及FUGW病毒阴性对照组,流式细胞术及荧光定量PCR鉴定BclGL在Jurkat细胞中的表达,Annexin V-APC/PI双染检测细胞凋亡变化.结果 酶切及测序证实人BclGL慢病毒表达载体构建成功,转染Jurkat细胞72 h后Jurkat细胞凋亡明显增加.结论成功构建了高效稳定表达人BclGL的重组慢病毒转染系统,并证实其对Jurkat淋巴细胞的促凋亡效应,为进一步探讨BclGL的生物学功能奠定了基础.
关键词：BclGL慢病毒表达载体Jurkat细胞凋亡
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30671886)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 252-256,260 )
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