呼吸道合胞病毒融合蛋白F在重组杆状病毒表达系统中的表达及抗原性研究
王善辉1
余兵兵2
王希良2
李培锋3
1.内蒙古农业大学动物医学与科学学院;军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2.军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室3.内蒙古农业大学动物医学与科学学院
摘要：目的 利用杆状病毒表达系统对RSV A型Long株F基因进行表达研究,为RSV重组亚单位疫苗的研制奠定基础.方法 用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增F基因,将其克隆到pFastBacHT A载体中,阳性重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,PER鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得含F基因的重组杆状病毒质粒,重组病毒感染Sf9细胞72 h后,进行SDS-PAGE电泳、间接免疫荧光和Western-blot试验.免疫Balb/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT试验检测T淋巴细胞增殖.结果 目的 蛋白F在昆虫细胞中有特异性表达,能被F蛋白单克隆抗体所识别,该蛋白诱导了高滴度的RSV特异性抗体.结论成功克隆RSV F基因,并在Sf9昆虫细胞中获得表达,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究开发RSV重组亚单位疫苗奠定了基础.
关键词：呼吸道合胞病毒重组杆状病毒融合蛋白F
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 267-270,274 )
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