人PSCA基因真核载体的构建与表达
张克勤
聂志林
梁培禾
孙中义
李彦锋
靳凤烁
1.第三军医大学大坪医院泌尿外科2.第三军医大学大坪医院泌尿外科3.第三军医大学大坪医院泌尿外科4.第三军医大学大坪医院泌尿外科5.第三军医大学大坪医院泌尿外科6.第三军医大学大坪医院泌尿外科
摘要：目的 克隆人PSCA(prosaae stem cell antigen)分子的cDNA,构建PSCA基因的真核表达载体,并在体外进行表达和鉴定.方法 从PSCA阳性细胞系LNCaP中提取总RNA,逆转录为cDNA.根据编码人PSCA的基因序列设计引物,以cDNA为模板,采用PCR技术扩增PSCA基因,将该基因插入到pcDNA3.1(+)真核载体,构建pcDNA3.1(+)-PSCA表达质粒.经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后,将重组质粒pcDNA3.1(+)-PSCA转染Hela细胞,检测其体外瞬时表达.结果 测序证实得到人PSCA基因序列,序列分析显示没有发生无义突变.RT-PCR和免疫细胞化学分析结果分别表明转染细胞有目的 基因和分子的表达.结论成功克隆人PSCA基因,并在真核细胞中获得表达,为进一步构建基于PSCA的肿瘤疫苗奠定了基础.
关键词：PSCA前列腺癌DNA疫苗
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30872586)重庆市自然科学基金(2008BB5015)第三军医大学回国人员启动基金(2007XG62)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 307-310 )
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