博尔纳病毒核蛋白的原核表达、纯化及鉴定
霍康
谢鹏
徐呜明
张晓东
展群岭
杨德雨
胡永波
1.重庆医科大学附属第一医院神经内科2.重庆医科大学附属第一医院神经内科3.重庆医科大学附属第一医院神经内科4.重庆医科大学附属第一医院神经内科5.重庆医科大学附属第一医院神经内科6.重庆医科大学附属第一医院神经内科7.重庆医科大学附属第一医院神经内科
摘要：目的 构建、表达、并纯化重组博尔纳病毒核蛋白(Borna disease vires,BDV),并鉴定该蛋白.方法 通过PCR反应从博尔纳病毒cDNA中扩增博尔纳病毒核蛋白P40基因,构建博尔纳病毒核蛋白P40基因重组质粒pET-14b-BD-VP40,转化大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白的表达,His-tag亲和层析纯化该蛋白,SDS-PAGE分析其表达量、表达形式和纯度;Western-blot法鉴定该蛋白.结果 成功构建蓖组质粒pET-14b-BDVP40,酶切鉴定、核酸序列分析正确,亲和层析纯化后纯度可达90%,Western-blot表明重组蛋白能与博尔纳病毒核蛋白单克隆抗体特异性结合.结论 在大肠杆菌中成功表达了可溶性的pET-14b-BDVP40融合蛋白,为进一步研究博尔纳病毒核蛋白作用机制及开发相应血清学检测试剂盒提供基础.
关键词：博尔纳病毒核蛋白原核表达
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家高技术研究发展计划(863计划)(20061002Z1093)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 385-388 )
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