shRNA干扰A549细胞KIAA0101基因表达的初步研究
李华1
马文丽2
左长清2
张宝2
郑文岭2
1.南方医科大学基因工程研究所;南方医科大学华瑞医院检验科2.南方医科大学基因工程研究所
摘要：目的 探讨小发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒介导的RNA干扰技术对人肺腺癌A549细胞KIAA0101基因表达的抑制作用.方法 应用pSIREN-RetroQ载体构建KIAA0101基因shRNA重组质粒,经脂质体法导入A549细胞,分别设置为空白对照组、阴性对照组、干扰A组和干扰B组,采用实时定量PCR法和免疫印迹(Western blot)法检测检测转染后细胞KIAA0101基因mRNA与表达蛋白质的变化,四唑盐(MTT)比色法测定各组干扰细胞活性.结果 成功构建KIAA0101基因shRNA重组质粒,相对阴性对照组与空白对照组,干扰B组KIAA0101的mRNA与蛋白质表达水平均下降达70%(P≤0.05)以上,MTT法结果显示降低KIAA0101的表达可抑制肺癌细胞的生长活性.结论 shRNA干扰质粒可以显著降低细胞内KIAA0101 mRNA与蛋白质的表达水平,并且抑制癌细胞的生长活性,为该基因在肺癌中的深入研究奠定了基础.
关键词：KIAA0101基因RNA干扰肺癌
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 529-531,535 )
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