人脐血单个核细胞Hlx基因的克隆、表达及其融合蛋白的免疫原性分析
戴晓莉
王胜军
苏兆亮
彭素芳
李雅贞
薛渊
何志强
陈建国
邵启祥
黄新祥
许化溪
1.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室2.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室3.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室4.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室5.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室6.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室7.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室8.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室9.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室10.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室11.江苏大学检验医学研究所免疫学研究室
摘要：目的 克隆人Hlx基因全长编码区,利用载体pQE30在大肠埃希菌M15中原核表达人Hlx基因,对表达产物进行纯化、免疫动物和制备多克隆抗体.方法 利用RT-PCR技术从人脐血单个核细胞中克隆出Hlx基因,构建重组表达质粒pQE30/Hlx,并于大肠埃希菌M15中表达,经Western blot判断,以可溶形式存在带6×His标签的融合蛋白,用Ni~(2+-)MAC层析柱对其进行纯化;将纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体.结果 成功)克隆人Hlx基因编码区全长,包含1 467 bp,编码488个氨基酸残基.获得人Hlx融合蛋白和多克隆抗体,ELISA和Western blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性.结论 成功构建了原核表达质粒pQE30/Hlx,经纯化获Hlx蛋白,制备了效价和特异性良好的多克隆抗体,为进一步研究人Hlx的生物学功能奠定了基础.
关键词：Hlx原核表达蛋白纯化多克隆抗体
分类号：Q343.1(遗传学分支学科)
资助基金：国家自然科学基金(30710103093)江苏大学大学生科研立项项目(06A080)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 625-628 )
英文信息