基于柔性肽连接的双特异性抗体分子的设计与结构模拟
邵长利1
高艳红1
高静1
王国华2
董振南1
1.解放军总医院生化科2.军事医学科学院基础医学研究所
摘要：目的 构建抗人红细胞与抗HIV-1p24抗原双特异性抗体分子基因并进行三维立体结构模拟,为双特异性抗体蛋白的表达奠定理论基础.方法 采用RT-PCR法从特异性分泌抗HIV-1p24抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D7中克隆单抗的可变区基因,构建抗HIV-1p24抗原单链抗体基因ScFv_(3D7),并通过ANTHEPROT5.0软件进行物理和化学以及二级结构预测,利用SWISS-MODLE软件进行立体结构模拟.通过15、30、45、60、75肽模拟连接单链抗体基因ScFv_(3D7)与ScFv_(2E8)(抗人红细胞H抗原,已制备),构建双特异性抗体分子基因,并进行立体结构预测.结果 由柔性肽(G_4S)_3连接的单链抗体基因ScFv_(3D7),大小为729 bp,编码243个氨基酸,等电点为5.665,相对分子质量为26 147.937.其二级结构分析显示了不同比例的螺旋、片层和转角结构,三维立体结构预测模型符合免疫球蛋白家族特征.采用不同长度的柔性肽模拟连接两个单链抗体基因,其中以75肽连接的双特异性抗体分子的三维立体模型形成了完整的蛋白分子.结论 基于75肽连接的双特异性抗体分子基因所模拟的立体结构可以认为是适合蛋白表达的分子模型.
关键词：单链抗体双特异性抗体结构模拟
分类号：R392-33(医学免疫学)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 632-637 )
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